Mutacje somatyczne STAT3 w dużej ziarnistej białaczce limfatycznej AD 6

U pacjentki występowała zarówno niedokrwistość, jak i neutropenia, leczono ją cyklosporyną i alemtuzumabem. Fosforylacja i translokacja do jądra STAT3
Barwienie immunohistochemiczne próbek z biopsji szpiku kostnego ze zdrowej kontroli i od trzech pacjentów z dużą ziarnistą białaczką limfatyczną. Panele od A do D pokazują skrawki parafinowe z próbek pobranych z biopsji szpiku barwionych przeciwciałami monoklonalnymi przeciwko fosforylowanym STAT3 (pSTAT) (po lewej) i CD57 (po prawej). W próbkach uzyskanych od zdrowych osób kontrolnych nie zaobserwowano barwienia (którego reprezentatywny przykład przedstawiono w Tablicy A). Próbki uzyskane od trzech pacjentów z dużą ziarnistą białaczką limfatyczną z mutacjami STAT3 (panele B, C i D) wykazują infiltrację limfocytów, które wybarwiają pSTAT3 (w jądrze) i CD57 (w cytoplazmie). Panel E pokazuje frakcjonowane jednojądrzaste komórki od zdrowego dawcy i od Pacjenta 30 i Pacjenta 1, którzy mieli mutacje Y640F i D661V STAT3, odpowiednio. Formy zmutowane są hiperfosforylowane i zlokalizowane głównie w jądrze. Znormalizowane porcje frakcji pełnej (W), cytozolowej (C) i jądrowej (N) rozdzielono na elektroforezie w żelu poliakryloamidowym z dodecylosiarczanem-poliakryloamidem i przeniesiono na membranę z fluorku poliwinylidenu, a analizę Western blot przeprowadzono z użyciem antygenu -pSTAT3, przeciwciała anty-STAT3 i anty-Erk1. Erk1 / 2 oznacza regulowane zewnątrzkomórkowo kinazy i 2.
Próbki biopsji szpiku kostnego uzyskano z jednej zdrowej grupy kontrolnej i od trzech pacjentów z dużą ziarnistą białaczką limfatyczną, jedną z mutacją D661V i dwiema z mutacją Y640F (Figura 3). Barwienie immunohistochemiczne wykazało, że naciek limfocytów u pacjentów z białaczką eksprymuje CD57, co jest typowe dla dużych granularnych limfocytów (Figura 3B, 3C i 3D). W przeciwieństwie do zdrowej kontroli (Figura 3A), pacjenci z białaczką mieli dodatnie zabarwienie jąder infiltrowanych limfocytów, z ufosforylowanym przeciwciałem STAT3 wskazującym na aktywację STAT3. Te wyniki zostały potwierdzone przez analizę Western blot próbek ekstraktu jądrowego od dwóch pacjentów (jeden z mutacją Y640F i jeden z mutacją D661V) i od zdrowej kontroli (Figura 3E).
Zwiększenie wartości docelowych transkrypcyjnych STAT3 u pacjentów z mutacjami STAT3
Figura 4. Figura 4. Ocena ilościowa genów reagujących na STAT3 u pacjentów z mutacjami STAT3 i aktywacja transkrypcji zależnej od STAT3 przez warianty wariantu dzikiego i zmutowanego białka. Panel A pokazuje średnie poziomy ekspresji RNA genów reagujących na STAT3 z sortowanych komórek CD8 uzyskanych od 5 zdrowych kontrolnych, 8 pacjentów z mutacjami STAT3 i 10 pacjentów bez mutacji STAT3, z zastosowaniem HumanHT-12 v4 Expression BeadChip Array ( Illumina)
[więcej w: usg genetyczne warszawa, iphone 5s case allegro, monoterapia ]

Powiązane tematy z artykułem: iphone 5s case allegro monoterapia usg genetyczne warszawa